近日，我校法醫學院嚴江偉教授團隊在國際分析化學領域頂級期刊《Sensors and Actuators B: Chemical》上發表了題為“Multiplex isothermal amplification-based immunochromatographic biosensor enhancing genuine-signal and suppressing pseudo-signal for on-site forensic test”的研究成果。

基于團隊以往等溫擴增結合磷酸鹽介導比色及側向流層析的研究（相關成果已發表在Talanta, org/10.1016/j.talanta.2024.126149和Analytical Chemistry, org/10.1021/acs.analchem.4c01623），本研究進一步建立了一種多重免疫層析生物傳感器。該傳感器增強了陽性結果的顯色強度，同時避免了假陽性結果的干擾，實現對痕量血痕的種屬和性別即時鑒定。

案件現場的生物檢材可提供重要的遺傳學信息以推動案件偵破。然而，由于犯罪嫌疑人對案件現場的破壞，獲取的生物檢材往往是痕量或降解的。因此，需要從痕量樣本中同時鑒定多個靶標以獲取盡可能多的生物學信息。盡管多重環介導等溫擴增結合免疫層析的方法可進行痕量樣本分析，但在多重環介導等溫擴增中，多個靶標共享底物，使得每個靶標的可檢測擴增產物減少，從而導致免疫層析試紙條上的顯色信號較弱。此外，該方法無法防止引物二聚體造成的假陽性結果。

本研究建立了一種多重免疫層析生物傳感器，旨在增強陽性結果的顯色信號并防止假陽性結果的干擾，以用于準確的現場檢測。通過使用生物標記的核苷酸標記擴增產物，擴增產物可被納米顆粒探針捕獲并在免疫層析試紙上產生比色信號。由于大量生物標記核苷酸的摻入，錨定在擴增子上的生物標記為納米顆粒探針提供了大量的識別位點，從而增強了陽性結果的顯色信號。同時，由于核苷酸無法與寡核苷酸結合，即使引物二聚體存在，其缺乏相應的可產生假陽性顯色信號的生物標記，從而防止了假陽性結果對結果準確性的干擾。此外，核苷酸作為一種擴增底物，在檢測不同靶標時可以通用，無需重新合成生物標記引物，提高了檢測靈活性（Sensors and Actuators B: Chemical, org/10.1016/j.snb.2025.138025）。